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       HE染色技術服務

      常規(HE)染色技術


          常規染色或HEHaematoxylin and eosin)染色。它是病理技術中最常用的一種方法,通過它可以做出病理診斷和發現尋求別的輔助方法,以達到準確,完整的病理診斷


      一、病理染色

      病理學的所有切片,都必須通過一種以上的染料,通過各種不同的方法,將切片中各種不同的物質,在不同染液的作用下,將其顯示出來,使之在光學顯微鏡下,能夠完全的觀看各種結構。例如,HE染色,好質量的切片可以清晰地顯示出許多不同的結構,細胞核著藍黑色,細胞漿著粉紅色,軟骨著藍色等。清晰的結構為診斷提供可靠的依據,因此,染色技術也是病理技術中的重要組成部分,必須不斷地總結,方能提高。如果染色不好,切片染色一團糟,紅藍不分,結構不清,層次不明,影響了鏡下的觀察,直接影響了臨床診斷,染色結果的好壞直接關系到診斷的準確性。


      二、染色方法及步驟

      1、脫水透明:

      由低濃度到高濃度酒精作脫水劑,逐漸脫去組織塊中的水份。再將組織塊置于既溶于酒精,又溶于石蠟的透明劑二甲苯中透明,以二甲苯替換出組織塊的中酒精。

      2、浸蠟包埋:

      將已透明的組織塊置于已溶化的石蠟中,放入溶蠟箱保溫。待石蠟完全浸入組織塊后進行包埋:先制備好容器,倒入已溶化的石蠟,迅速夾取已浸透石蠟的組織塊放入其中。冷卻凝固成塊。

      3、切片與貼片:

      將包埋好的蠟塊固定于切片機上,切成薄片, 5—8微米厚。切下的薄片放到加熱的水中燙平,再貼到載玻片上,放45℃恒溫箱中烘干。

      4、人工蘇木素,伊紅染色法(HE法)
      (1)
      切片浸入二甲苯中5-10min
      (2)
      切片浸入二甲苯中5-10min
      (3)100%
      酒精1min
      (4)100%
      酒精1min
      (5)95%
      酒精1min
      (6)95%
      酒精1min
      (7)90%
      酒精1min
      (8)80%
      酒精1min
      (9)
      自來水洗1min
      (10)
      浸入蘇木素染液浸染10-15min
      (11)
      自來水洗30second-1min
      (12)1%
      鹽酸酒精分化30second
      (13)
      流水沖洗15min以上。
      (14)1%
      伊紅酒精染3-5min
      (15)90%
      95%酒精分化30sec
      (16)95%
      酒精30sec-1min
      (17)95%
      酒精30sec-1min
      (18)95%
      酒精30sec-1min
      (19)100%
      酒精1min
      (20)100%
      酒精1-2min
      (21)
      碳酸二甲苯1min
      (22)
      二甲苯1-2min
      (23)
      二甲苯1-2min
      (24)
      二甲苯1-2min
      (25)
      中性樹膠封固。


      三、結果提供 細胞核被染成深藍黑色;細胞漿被染成粉紅色;軟骨及鈣鹽被染成藍色;膠原纖維染成淡粉紅色,嗜酸性細胞及嗜酸性顆粒呈鮮紅色;彈力纖維呈淡粉紅色;某些蛋白性物呈粉紅色等。

      1、完整的實驗報告(包含試劑、耗材、操作步驟、病理結果);

      2、原始病理照片,一般提供100倍、400倍照片各2張;

      3、如果客戶提供的是組織,我們提供石蠟塊、染色片


      四、樣本要求:

      取材保持組織新鮮(組織塊以小于2cm*1.5cm*0.3cm為宜),立即放入固定液(固定液用10%福爾馬林液或4%多聚甲醛緩沖液,體積為組織塊的10倍以上)中,避免干燥,4°冰箱保存

      結果展示


      威斯騰實驗服務流程:




      威斯騰生物服務項目


      分子生物學檢測蛋白質與免疫學動物實驗
      實時熒光定量PCR單克隆抗體制備帕金森疾病模型
      免疫共沉淀(Co-IP)多克隆抗體制備抑郁癥動物模型
      ELISA(酶聯免疫吸附法)技術Western-blot 實驗服務脊髓損傷模型
      生化指標檢測蛋白雙向電泳實驗服務腦外損傷模型
      雙熒光素酶報告基因檢測原核蛋白表達純化骨神經損傷模型
      染色質免疫共沉淀(ChIP)真核蛋白表達純化心肌缺血模型
      GST pull DownITRAQ定量蛋白質組學心力衰竭模型
      SLAC蛋白組學肺動脈高血壓動物模型
      高血壓模型
      病毒包裝純化實驗課題整體外包粥樣動脈硬化模型
      過表達/干擾慢病毒包裝純化整體課題外包大腦中動脈阻塞模型
      過表達/干擾腺病毒包裝純化細胞整體實驗外包慢性之氣管炎模型
      逆轉錄病毒包裝純化動物整體實驗外包過敏性哮喘模型
      腺相關病毒包裝純化肺炎大鼠模型
      肝炎-肝硬化-肝癌模型
      蛋白芯片原代細胞培養肝纖維化模型
      細胞因子芯片骨髓間充質干細胞培養膽結石模型
      生長因子芯片脂肪干細胞培養急性胰腺炎模型
      信號通路磷酸化水平檢測芯片心肌成纖維細胞培養急性腎衰竭模型
      BioPlex懸浮芯片軟骨細胞培養體內血栓模型
      生長因子芯片血管內皮細胞培養關節炎模型
      炎癥因子芯片神經元細胞培養I型和II型糖尿病模型
      血管生成因子芯片內皮組細胞原代培養裸鼠成瘤
      凋亡因子芯片基因編輯動物
      趨化因子芯片電生理相關服務動物整體實驗服務
      HuProt TM 20K人類蛋白組芯片膜片鉗實驗
      細胞生物學高通量測序代謝組學
      細胞原代培養mRNA測序氣相色譜GC/MS
      MTT檢測LncRNA測序液相色譜LC/MS
      細胞凋亡檢測全基因組測序核磁共震NMR
      細胞周期檢測RNA-Seq測序
      細胞克隆形成實驗外顯子測序影像學相關實驗
      Transwell細胞遷移/侵襲16s擴增子測序Micro-CT
      流式分選Small RNA測序小動物活體成像
      CCK8/XTT檢測宏基因組測序核磁共振
      臺盼藍檢測細胞活性單細胞測序PET-CT
      藥物篩選細胞學實驗circleRNA測序
      細胞粘附性檢測甲基化測序基因編輯動物
      細胞劃痕實驗條件性敲除小鼠/大鼠
      細胞生物學整體實驗全基因敲除小鼠/大鼠
      細胞成管實驗
      病理學檢測CRISPR/Cas9細胞敲除/敲入基因芯片
      掃描電鏡基因定點突變細胞系LncRNA芯片
      透射電鏡單基因敲除細胞系miRNA芯片
      HE染色多基因敲除細胞系mRNA芯片
      免疫組化目的基因敲入細胞系甲基化芯片(限人和小鼠來源樣本)
      Tunel(原位末端凋亡法)檢測報告基因敲入細胞系SNP芯片(限人和小鼠來源樣本)
      激光共聚焦miRNA/LncRNA敲除細胞系
      免疫熒光
      Masson染色CRISPR/Cas9動物敲除/敲入科研方案設計與SCI相關服務
      原位雜交基因敲除大鼠/小鼠科研文獻論著翻譯
      熒光原位雜交基因敲入大鼠/小鼠SCI論文翻譯潤色服務
      特殊染色(PSA、茜素紅、阿爾新藍等)臨床實驗/科研實驗設計方案指導
      行為學檢測藥物篩選服務項目藥效學評價
      水迷宮實驗高通量自動藥物篩選平臺神經系統藥物藥效學評價
      曠場實驗細胞高內涵藥物篩選平臺抗腫瘤藥物藥效學評價
      重復性刻板行為檢測蛋白質組學靶標研發平臺心血管系統藥物藥效學評價
      動物跑臺檢測分子藥理研究平臺泌尿系統藥物藥效學評價
      強迫游泳生物膜片鉗藥物篩選平臺內分泌系統藥物藥效學評價
      常規藥物體外篩選抗炎免疫藥物藥效學評價


      【本平臺合作項目】

      分子生物學、細胞生物學、病理染色檢測、細胞敲除&敲入、模式與轉基因動物、SPF動物保種、免疫學檢測、影像學檢測、原代培養、細胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學、代謝組學、高通量高內涵篩選、藥效學評價、藥理毒理學實驗、慢病毒包裝與穩轉株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學分析、知識產權服務!

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