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       蛋白質譜分析

      蛋白質譜分析



      蛋白質經過蛋白酶的酶切消化后成肽段混合物,在質譜儀中肽段混合物電離形成帶電離子,質譜分析器的電場、磁場將具有特定質量與電荷比值(即質荷比,M/Z)的肽段離子分離開來,經過檢測器收集分離的離子,確定每個離子的M/Z值。經過質量分析器可分析出每個肽段的M/Z,得到蛋白質所有肽段的M/Z圖譜,即蛋白質的一級質譜峰圖。

      通過實際譜圖和理論上蛋白質經過蛋白酶消化后產生的一級質譜峰圖和二級質譜峰圖進行的比對,進行蛋白鑒定。




      設備儀器:

      美國安捷倫公司Agilent (xct-6330) 型號的液相色譜儀,MS為美國熱電公司的TSQ型號質譜儀;質譜儀采用ESI(電噴霧電離)離子源,MS/MS 串連四極桿分析器。可在線檢測極性有機化合物、核酸、多肽、小分子蛋白質及其化學修飾產品的實際分子量,并對送檢樣品進行分子量鑒定,純度及修飾效果分析。

      質量范圍M/Z 10~2,000  分辨率R=2M


      設備應用:

      芯片/質譜 (HPLC-Chip/MS) ——顯著提高了納流液-質聯用分析結果的靈敏度,可靠性和分析速度 安捷倫推出了世界第一臺的基于微流控技術的納流液相色譜芯片-質譜平臺。 這項技術將主要用于蛋白質組學和藥物分析方面。其核心是采用可重復使用的聚合物液相色譜芯片取代傳統的液相色譜柱。這個平臺將多維色譜集成在一塊芯片上,采用插拔式設計,操作簡單與標準液相色譜/質譜聯用儀相比, 它的其靈敏度提高了3,500倍。盡管芯片的體積很小,但是可以容納最長20 厘米的有C18填料的色譜柱。液相色譜/芯片作為一個模塊與安捷倫的所有6000系列液-質聯用儀完全兼容。 液相色譜-芯片技術主要應用蛋白質組學研究和藥物標靶研究等領域。有關的應用發表在許多國際知名的雜志上,如Analytical Chemistry; Electrophoresis, PNS上液相色譜芯片產品主要包括七種類型的芯片涵蓋大分子和小分子的應用:
      * 酶解蛋白質鑒定芯片

      * 酶解蛋白質鑒定芯片

      * 寡聚糖的芯片

      * 直接進樣芯片
      * 小分子芯片

      * 質譜校正和診斷芯片

      * 全蛋白質分析芯片


      測試范圍:
      多肽、蛋白質的電噴霧質譜分子量測定以及天然產物分子、生物大分子、有機分子的質譜測試和研究


      送檢樣品要求:

      樣品應盡量不含鹽份、離子表面活性劑、去垢劑及一些難揮發性鹽。樣品送檢量、溶解方式以及未知可否做質譜檢測的樣品可與我們的工作人員聯系以便提高檢測效率。(送樣單請附帶檢測樣品的品名及精確計算分子量)


      送樣須知:

      A:樣品量:50pmol干粉或1ug/uL以上(一般測試)、100pmol干粉或1ug/uL以上(MALDI串聯質譜分析)、100ug干粉以上(二硫鍵分析、糖基化分析,磷酸化分析,其他修飾分析)、10ug干粉以上(SDS-PAGE或IEF);

      B:鹽含量:揮發性無機鹽,<20mM,請勿使用PBS、SDS和尿素等質譜干擾物質;

      C:考馬斯亮藍染色樣品可全部接收,銀染過程中不得使用glutaraldehyde作為固定劑;

      D:請告知樣品是否有修飾,并請注明修飾方式。


      主要應用 :
      * 蛋白質組學研究 

      * 寡聚糖和糖蛋白的研究 

      * 小分子化合物分析

      * 藥物發現和研發 

      * 食品和環境樣品分析


      威斯騰實驗服務流程





      威斯騰生物服務項目


      分子生物學檢測蛋白質與免疫學動物實驗
      實時熒光定量PCR單克隆抗體制備帕金森疾病模型
      免疫共沉淀(Co-IP多克隆抗體制備抑郁癥動物模型
      ELISA(酶聯免疫吸附法)技術Western-blot 實驗服務脊髓損傷模型
      生化指標檢測蛋白雙向電泳實驗服務腦外損傷模型
      雙熒光素酶報告基因檢測原核蛋白表達純化骨神經損傷模型
      染色質免疫共沉淀(ChIP真核蛋白表達純化心肌缺血模型
      GST pull DownITRAQ定量蛋白質組學心力衰竭模型
      SLAC蛋白組學肺動脈高血壓動物模型
      高血壓模型
      病毒包裝實驗課題整體外包粥樣動脈硬化模型
      過表達/干擾慢病毒包裝純化整體課題外包大腦中動脈阻塞模型
      過表達/干擾腺病毒包裝純化細胞整體實驗外包慢性之氣管炎模型
      逆轉錄病毒包裝純化動物整體實驗外包過敏性哮喘模型
      腺相關病毒包裝純化肺炎大鼠模型
      肝炎-肝硬化-肝癌模型
      蛋白芯片原代細胞培養肝纖維化模型
      細胞因子芯片骨髓間充質干細胞培養膽結石模型
      BioPlex懸浮芯片脂肪干細胞培養急性胰腺炎模型
      生長因子芯片心肌成纖維細胞培養急性腎衰竭模型
      炎癥因子芯片軟骨細胞培養體內血栓模型
      血管生成因子芯片血管內皮細胞培養關節炎模型
      凋亡因子芯片神經元細胞培養I型和II型糖尿病模型
      趨化因子芯片內皮組細胞原代培養裸鼠成瘤
      HuProt TM 20K人類蛋白組芯片基因編輯動物
      電生理相關服務動物整體實驗服務
      膜片鉗實驗
      細胞生物學檢測高通量測序代謝組學
      細胞原代培養mRNA測序氣相色譜GC/MS
      MTT檢測LncRNA測序液相色譜LC/MS
      細胞凋亡檢測全基因組測序核磁共震NMR
      細胞周期檢測RNA-Seq測序
      細胞克隆形成實驗外顯子測序影像學相關實驗
      Transwell細胞遷移/侵襲16s擴增子測序Micro-CT
      流式分選Small RNA測序小動物活體成像
      CCK8/XTT檢測宏基因組測序核磁共振
      臺盼藍檢測細胞活性單細胞測序PET-CT
      藥物篩選細胞學實驗circleRNA測序
      細胞粘附性檢測甲基化測序基因編輯動物
      細胞劃痕實驗條件性敲除小鼠/大鼠
      細胞生物學整體實驗全基因敲除小鼠/大鼠
      細胞成管實驗
      病理檢測CRISPR/Cas9細胞敲除/敲入基因芯片
      掃描電鏡基因定點突變細胞系LncRNA芯片
      透射電鏡單基因敲除細胞系miRNA芯片
      HE染色多基因敲除細胞系mRNA芯片
      免疫組化目的基因敲入細胞系甲基化芯片(限人和小鼠來源樣本)
      Tunel(原位末端凋亡法)檢測報告基因敲入細胞系SNP芯片(限人和小鼠來源樣本)
      激光共聚焦miRNA/LncRNA敲除細胞系
      免疫熒光
      Masson染色CRISPR/Cas9動物敲除/敲入科研設計指導&文章評估/潤色
      原位雜交基因敲除大鼠/小鼠科研文獻論著翻譯
      熒光原位雜交基因敲入大鼠/小鼠論文翻譯潤色服務
      特殊染色(PSA、茜素紅、阿爾新藍等)臨床實驗/科研實驗設計方案指導
      行為學檢測藥物篩選服務項目藥效學評價
      曠場實驗高通量自動藥物篩選平臺抗腫瘤藥物藥效學評價
      重復性刻板行為檢測細胞高內涵藥物篩選平臺心血管系統藥物藥效學評價
      動物跑臺檢測蛋白質組學靶標研發平臺泌尿系統藥物藥效學評價
      強迫游泳分子藥理研究平臺內分泌系統藥物藥效學評價
      生物膜片鉗藥物篩選平臺抗炎免疫藥物藥效學評價
      常規藥物體外篩選


      【本平臺合作項目】
      分子生物學、細胞生物學、基因敲出/入、模式動物、SPF動物保種、病理學檢測、免疫學檢測、影像學檢測、原代培養、細胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學、代謝組學、高通量高內涵篩選、藥效學評價、藥理毒理學實驗、慢病毒包裝與穩轉株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學分析、知識產權服務! 
      【全國免費熱線】400-675-6758
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