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       SNP篩查和鑒定——TaqMan法


      SNP
      篩查和鑒定——TaqMan


      簡介:
      人類基因組中存在著廣泛的多態性,最簡單的多態形式是發生在基因組中的單個核苷酸的替代,即單核苷酸多態性(single nucleotide polymorphisms, SNP)。SNP的數量大、分布廣,在組成人類基因組30億個堿基中,平均每1000個就有一個SNPSNP作為第三代遺傳標記,在復雜疾病的基因定位、關聯分析、個體疾病易感性分析與藥物基因組學的研究中發揮著愈來愈重要的作用。為適應日益增長的 SNP研究需求,和各類客戶的不同需要,威斯騰生物中心利用多套技術方案為不同客戶提供量身定做的個性化服務。


      TaqMan
      探針法:

       

      特點:

      1、先進的熒光檢測技術:一束激光掃描并激活96個孔的每一個孔里的熒光染料,實現多色熒光同時檢測。2、通量大,速度快,一批樣本分析只需2個小時;

       

      原理:

      1、   聚合:在Taq Man探針的5'3'端分別連接一個熒光報告(R)染料和一個淬滅物(Q)正向引物探針反向引物

      2、   鏈置:換當探針完整時,報告染料發射的熒光被淬滅

      3、   裂解:在每一次延伸循環中,DNA多聚酶將探針上的報告染料裂解出來

      4、   聚合完成:報告染料一旦與淬滅物分離即發出它特有的熒光

      實驗流程:

      1DNA提取,設計引物并合成

      2PCR

      3、上機檢測,數據采集以及分析


      客戶需知:

      1、   準確的基因名稱和序列以及SNP位點信息

      2、   提供樣品要:A、血液樣品(至少4ml、需加EDTA);B、基因組DNA 樣品,需-20度保存和運輸

      3、   純度要求:OD260/2801.6~1.8之間;OD260/2301.8~2.2之間

      4、   濃度要求( C) :基因組DNA濃度大于100ng/ul

      5、   單個PCR反應量(M)50ng    

      6、   DNA用量需求( UL):PCR反應個數(N* M/ C


      結果提供:

      1、   提供電子版結果及實驗流程

      2、   提供數據分析服務

      3、   實驗數據及實驗剩余的樣品和引物為客戶所有


      實驗費用:

      1DNA提取費用

      2、引物設計及合成費用

      3PCR擴增費用

      4、上機費用

      5、數據分析費用


      威斯騰實驗服務流程




      威斯騰實驗服務項目




      【本平臺合作項目】
      分子生物學、細胞生物學、基因敲出/入、模式動物、SPF動物保種、病理學檢測、免疫學檢測、影像學檢測、原代培養

      細胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學、代謝組學、高通量高內涵篩選、藥效學評價、

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